Einfluss der Kultur bedingungen auf das Wachstum von Escherichia Coli

Die Verwendung von E. coli zur Herstellung von Arzneimitteln ist eine biologische Methode. Das heißt, der Einsatz von Bioengineering-Technologie zur Übertragung von Fremd genen in E. coli, Fermentation und Kultur zur Expression, Zentr ifugation, um die Bakterien zu sammeln, und verwenden Sie dann eine spezifische Lösung, um die Bakterien zu brechen und sie zu sammeln. Das Ziel protein wird nach einiger nachfolgender Verarbeitung zur Medizin verarbeitet.

1. Kultur temperatur

Experimente zeigen, dass die optimale Kultur temperatur im Bereich von 35 bis 40 ° C liegt und die Zell dichte mit dem Temperatur anstieg zunimmt, was mit den allgemeinen Wachstums eigenschaften von E überein stimmt. coli. Die Wachstums rate ist jedoch bei 37 ° C ~ 38 ° C schneller, und das nachfolgende Wachstum ist relativ flach. Durch die Kombination der allgemeinen Kultur eigenschaften von E. coli und des Kreuz einfluss von Temperatur und anderen Einfluss faktoren wurde die Kultur temperatur im Experiment auf 37,5 ° C eingestellt.

2. pH-Wert

Nach der Kultivierung von E. coli für 18h mit unterschied lichen pH-Werten zeigen die Testergebnisse, dass der pH-Wert von 8,0 keinen signifikanten Einfluss auf die Zell dichte hat, und der pH-Wert ist zu niedrig oder zu hoch, um gute Ergebnisse zu erzielen. Wenn der pH-Wert 7,5 beträgt, ist die Zell dichte relativ am höchsten und ihr OD600nm erreicht 3,25.

3. Der Einfluss von gelöstem Sauerstoff auf das Wachstum von Bakterien

Entsprechend dem unterschied lichen Index für gelösten Sauerstoff im Fermentor wurde die Zell dichte des Fermentation systems erhalten, wenn es 18 Stunden lang kultiviert wurde. Experimentelle Ergebnisse zeigen, dass die Zell dichte mit dem Anstieg des Index des gelösten Sauerstoffs kontinuierlich zunimmt, die Zell dichte jedoch nach 50% langsam ansteigt.

4. Einfluss der Impf menge

Die Optimierung unterschied licher Impf mengen kann einen größeren Einfluss auf das Wachstum von Bakterien haben. Mit 3% bis 4% ist der Wachstums zustand von Bakterien besser als der von zu niedrigen oder hohen Impf mengen. Zu niedrige Impf mengen machen das Wachstum von Bakterien zu langsam. Eine zu hohe Inokulum menge verbraucht im Früh stadium eine große Menge an Nährstoffen und verursacht eine Verschwendung von Samens tämmen, sodass im Experiment eine 4% ige Inokulum menge verwendet wurde.

5. Bestimmung der Kultur zeit

Die experimentellen Ergebnisse verschiedener Inkubationszeiten zeigten, dass die Bakterien um ein Vielfaches von 12 auf 18 Stunden zunahmen und dann langsam wuchsen. Es zeigt, dass im späteren Stadium des exponentiellen Wachstums die Energie von Bakterien nicht für die Massen vermehrung geeignet ist, sondern von Metaboliten beeinflusst wird. Um den Wachstums zyklus zu verkürzen, sollte die Ernte von Bakterien daher in der späten exponentiellen Wachstums periode, dh 18h, erfolgen.

6. Bestimmung der Geschwindigkeit

Die Geschwindigkeit des Schüttel inkubators nimmt mit der Zunahme des gelösten Sauerstoffs zu und die Zell dichte nimmt entsprechend zu. Die Wachstums rate der Zell dichte ist schneller bei 100 ~ 200r/min und relativ langsam bei 200 ~ 300r/min, dies zeigt an, dass die Geschwindigkeit von 200r/min bereits die Auflösung von Sauerstoff in der Luft fördern kann. In Anbetracht dessen, dass die Erhöhung der Geschwindigkeit nachteilige Auswirkungen wie Schaum hervorrufen kann, beträgt die beste im Test angenommene Geschwindigkeit 200r/min.

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